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BCA蛋白定量檢測試劑盒

貨號:G2026-1000T

品牌:Servicebio

價格:¥600

規格: 1000T

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  產品簡介:

  本公司生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒是根據目前廣泛應用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法研制而成。其操作簡單,靈敏度高,所形成的顏色復合物穩定性佳,受干擾物質影響小??蓹z測濃度下限達25 μg/mL的蛋白樣品,最小檢測蛋白量達到0.5 μg,待測樣品體積為1-20 μL。 本產品主要成分為:BCA二鈉鹽,無水碳酸鈉,酒石酸鉀,氫氧化鈉,碳酸氫鈉和硫酸銅。

  包裝內容:

產品貨號 產品名稱 規格
G2026-1 BCA試劑 40 mL/100 mL×2
G2026-2 硫酸銅溶液 1.2 mL/1.2 mL×5
G2026-3 蛋白標準品(BSA)(4℃) 25 mg/25 mg×5
G2026-4 蛋白標準配制液 1.5 mL/1.5 mL×5

  保存條件:

  整套試劑常溫保存,有效期12個月。蛋白標準品4℃保存,溶解后應放-20℃保存。

  使用方法:

  1.取1 mL蛋白標準配置液加入到25 mgBSA的蛋白標準管中,完全溶解蛋白標準品,即為25 mg/mL的蛋白標準溶液。配制成的蛋白標準溶液可-20℃長期保存。

  2.取適量25 mg/mL蛋白標準溶液,稀釋至終濃度為0.5 mg/mL。標準品最好與蛋白樣品用同樣的溶液稀釋。但為了簡便起見,通常使用0.9% NaCl或PBS稀釋標準品。

  3.做標準曲線。將標準品按0,1,2,4,8,12,16,20μL加到96孔板中,不足20 μL的加標準品稀釋液補足到20 μL。

  4.將待測的蛋白樣品稀釋至合適濃度,加到96孔板中,使待測樣品總體積也為20 μL。

  5.根據樣品數量,按50體積BCA試劑加1體積硫酸銅溶液(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫24小時內穩定。

  6.每孔加入BCA工作液200 μL,充分混勻(可將酶標板放在振蕩器上振蕩30s),37℃放置30 min后,以標準曲線0號做參比,在562nm波長下比色測定,記錄各孔吸光度值。(注:也可以在室溫放置2 h,或60℃放置30 min。如果蛋白濃度較低,最好放在60℃條件下反應。)

  7.以標準品蛋白含量(μg)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪出標準曲線。根據所測樣品的吸光值,在標準曲線上即可查得相應的蛋白含量(μg),除以樣品稀釋液總體積(20 μL),乘以樣品稀釋倍數即為樣品實際濃度。

  注意事項:

  1.BCA法測定蛋白濃度受溫度和時間的影響較大,吸光度值會隨著時間的延長不斷升高,且顯色反應會因溫度的升高而加快。如果不能精確控制顯色反應的時間和溫度,建議每次測定都需要做標準曲線。

  2.本試劑也適用與分光光度計測定,但需要根據測定的最小體積調整樣品和BCA工作液的用量。

  3.為保證蛋白的精確定量,樣品的提取和標準蛋白的配制最好選用相同的緩沖液,同時也要保證兩者檢測條件的一致性。如果緩沖液本身就有較高的背景值,建議使用其他的方法測定。

  4.BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,Tween 60,Tween 80。但在樣品含有脂類物質時將明顯提高吸光度值。且受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響,需確保EDTA低于10mM,無EGTA,二硫蘇糖醇或β-巰基乙醇低于1mM。不適用BCA法時建議使用其他方法測定。

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